權(quán)利要求

1.可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，其特征在于，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期：2021年9月22日，保藏編號：CGMCC No.23463，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，其特征在于，所述節(jié)桿菌菌株的16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。 3.可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的獲取方法，用于獲取權(quán)利要求1或2所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，其特征在于，包括如下步驟： S1，活性污泥加入到含芥酸酰胺的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)2-7天，獲得富集菌液，所述活性污泥來源于印染廢水污水處理廠生化池； S2，將步驟S1的富集菌液采用稀釋涂布法以及劃線法在含芥酸酰胺的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離和純化，獲得多株純化菌株； S3，將步驟S2中的多株純化菌株分別接種到芥酸酰胺為唯一氮源的限制氮源培養(yǎng)基、芥酸酰胺為唯一碳源的限制碳源培養(yǎng)基、芥酸酰胺為唯一營養(yǎng)源的限制營養(yǎng)源培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分別測量細(xì)菌濃度和芥酸酰胺降解率，選擇細(xì)菌濃度和芥酸酰胺降解率均較高的菌株，即為可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌。 4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的獲取方法，其特征在于，步驟S1中，所述含芥酸酰胺的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基包括NH 4Cl 0.38g/L、NaCl 5g/L、K2HPO4 0.5g/L、KH2PO4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L、FeSO 4·7H 2O 0.001g/L和芥酸酰胺0.3-0.9g/L。 5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的獲取方法，其特征在于，步驟S2中，所述含芥酸酰胺的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基包括NH 4Cl 0.38g/L、NaCl 5g/L、K2HPO4 0.5g/L、KH2PO4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L、FeSO 4·7H 2O 0.001g/L、芥酸酰胺0.3-0.9g/L和瓊脂1.5-2％。 6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的獲取方法，其特征在于，步驟S3中，所述芥酸酰胺為唯一氮源的限制氮源培養(yǎng)基包括芥酸酰胺0.9g/L、乙酸鈉3.42g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L和FeSO 4·7H 2O 0.001g/L；所述芥酸酰胺為唯一碳源的限制碳源培養(yǎng)基包括芥酸酰胺0.9g/L、NH 4Cl0.38g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L和FeSO 4·7H2O 0.001g/L；所述芥酸酰胺為唯一營養(yǎng)源的限制營養(yǎng)源培養(yǎng)基中培養(yǎng)包括芥酸酰胺0.9g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 20.01g/L和FeSO 4·7H2O 0.001g/L。 7.可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的培養(yǎng)方法，用于培養(yǎng)權(quán)利要求1或2所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，其特征在于，將權(quán)利要求1或2所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌接種至專用培養(yǎng)基中，于25℃～35℃的搖床震蕩培養(yǎng)48h以上，所述專用培養(yǎng)基包括NH 4Cl 0-1.52g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L、FeSO 4·7H 2O 0.001g/L和芥酸酰胺0.3-0.9g/L，所述專用培養(yǎng)基的pH為5.0-7.0。 8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述搖床的轉(zhuǎn)速為160r/min，所述震蕩培養(yǎng)的時間為48～66h。 9.可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的應(yīng)用，其特征在于，權(quán)利要求1或2所述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌在印染廢水處理中用于降解芥酸酰胺。

說明書

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物及環(huán)境保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌及其獲取方法、培養(yǎng)方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

芥酸酰胺，分子式為C 22H 43NO，最重要的用途之一是作為抗靜電劑、爽滑劑、脫模劑和抗粘結(jié)劑。廣泛應(yīng)用于塑料薄膜制品、油墨以及橡膠中，另外芥酸酰胺在高級潤滑油、染料分散劑、造紙和紡織等行業(yè)都有廣泛的應(yīng)用。在印染紡織行業(yè)，芥酸酰胺常用于紗線類以及針織物的前處理工序中，使織物柔軟并抗皺，一般添加量在0.05％-0.2％。通過GC-MS分析印染紡織行業(yè)廢水的特征污染物時，發(fā)現(xiàn)在紗線類印染廢水以及針織物這類產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝會造成出水中酰胺類、酯類物質(zhì)具有較高的濃度，芥酸酰胺在其中占了較大的比例。而芥酸酰胺在出水中含量多會使出水COD升高，一旦超出標(biāo)準(zhǔn)，對環(huán)境及生態(tài)有很大的危害，同時印染企業(yè)也會面臨處罰，因此亟需解決印染紡織行業(yè)出水中芥酸酰胺的問題。

芥酸酰胺的處理方法通常是化學(xué)法，由于芥酸酰胺的性質(zhì)較為穩(wěn)定，物理法通常無法處理。而化學(xué)法處理芥酸酰胺常常需要引入其他化學(xué)物質(zhì)，不僅容易造成二次污染，而且成本也高。生物法處理印染廢水，不僅成本低廉，效率高，而且綠色環(huán)保，不會對環(huán)境造成二次污染，是目前應(yīng)用最為廣泛的處理方法。目前，國內(nèi)有關(guān)生物法降解芥酸酰胺的研究很少，而能夠降解芥酸酰胺的菌株幾乎沒有，因此對降解芥酸酰胺的菌株生理生化特性的以及降解芥酸酰胺的效率進(jìn)行深入研究很有必要，具有重要的理論和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌及其獲取方法、培養(yǎng)方法和應(yīng)用，目的是為了解決物理法通常無法處理廢水中的芥酸酰胺，化學(xué)法處理芥酸酰胺常常需要引入其他化學(xué)物質(zhì)，不僅容易造成二次污染，而且成本也高，而利用生物法中幾乎沒有合適的菌株用于降解芥酸酰胺的技術(shù)問題。

本發(fā)明提供的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，具體技術(shù)方案如下：

可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期：2021年9月22日，保藏編號：CGMCC No.23463，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所。

在某些實(shí)施方式中，所述節(jié)桿菌菌株的16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本發(fā)明提供的第二技術(shù)方案為可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的獲取方法，用于獲取上述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，包括如下步驟：

S1，活性污泥加入到含芥酸酰胺的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)2-7天，獲得富集菌液，所述活性污泥來源于印染廢水污水處理廠生化池；

S2，將步驟S1的富集菌液采用稀釋涂布法以及劃線法在含芥酸酰胺的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離和純化，獲得多株純化菌株；

S3，將步驟S2中的多株純化菌株分別接種到芥酸酰胺為唯一氮源的限制氮源培養(yǎng)基、芥酸酰胺為唯一碳源的限制碳源培養(yǎng)基、芥酸酰胺為唯一營養(yǎng)源的限制營養(yǎng)源培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分別測量細(xì)菌濃度和芥酸酰胺降解率，選擇細(xì)菌濃度和芥酸酰胺降解率均較高的菌株，即為可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌。

在某些實(shí)施方式中，步驟S1中，所述含芥酸酰胺的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基包括NH 4Cl0.38g/L、NaCl 5g/L、K2HPO4 0.5g/L、KH2PO4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L、FeSO 4·7H 2O 0.001g/L和芥酸酰胺0.3-0.9g/L。

在某些實(shí)施方式中，步驟S2中，所述含芥酸酰胺的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基包括NH 4Cl0.38g/L、NaCl 5g/L、K2HPO4 0.5g/L、KH2PO4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L、FeSO 4·7H 2O 0.001g/L、芥酸酰胺0.3-0.9g/L和瓊脂1.5-2％。

在某些實(shí)施方式中，步驟S3中，所述芥酸酰胺為唯一氮源的限制氮源培養(yǎng)基包括芥酸酰胺0.9g/L、乙酸鈉3.42g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L和FeSO 4·7H 2O 0.001g/L；所述芥酸酰胺為唯一碳源的限制碳源培養(yǎng)基包括芥酸酰胺0.9g/L、NH 4Cl 0.38g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L和FeSO 4·7H2O 0.001g/L；所述芥酸酰胺為唯一營養(yǎng)源的限制營養(yǎng)源培養(yǎng)基中培養(yǎng)包括芥酸酰胺0.9g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 40.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L和FeSO 4·7H2O 0.001g/L。

本發(fā)明提供了第三個技術(shù)方案，即可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的培養(yǎng)方法，用于上述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，將上述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌接種至專用培養(yǎng)基中，于25℃～35℃的搖床震蕩培養(yǎng)48h以上，所述專用培養(yǎng)基包括NH 4Cl 0-1.52g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L、FeSO 4·7H 2O0.001g/L和芥酸酰胺0.3-0.9g/L，所述專用培養(yǎng)基的pH為5.0-7.0。

在某些實(shí)施方式中，所述搖床的轉(zhuǎn)速為160r/min，所述震蕩培養(yǎng)的時間為48～66h。

本發(fā)明提供了第四個技術(shù)方案，即可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的應(yīng)用，上述的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌在印染廢水處理中用于降解芥酸酰胺。

本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明提供的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌，是從印染廢水污水處理廠生化池，亦是目前唯一一株具備降解芥酸酰胺的菌株，因而能夠應(yīng)用于印染污水處理領(lǐng)域，對芥酸酰胺的降解率大于55％并對環(huán)境無污染，達(dá)到快速降解COD的效果，為生物法處理芥酸酰胺提供了較大的技術(shù)支持，為印染污水處理帶來了巨大的技術(shù)前景，對于印染污水行業(yè)具有重大意義。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中選擇培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖；

圖2是本發(fā)明實(shí)施例1中可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌掃描電鏡圖；

圖3是本發(fā)明實(shí)施例1中可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌菌株系統(tǒng)發(fā)育樹；

圖4是本發(fā)明實(shí)施例2中培養(yǎng)基初始pH對菌株的影響圖；

圖5是本發(fā)明實(shí)施例2中芥酸酰胺濃度對菌株的影響圖；

圖6是本發(fā)明實(shí)施例2中培養(yǎng)基初始氮源濃度對菌株的影響圖；

圖7是本發(fā)明實(shí)施例2中培養(yǎng)溫度對菌株的影響圖；

圖8是本發(fā)明實(shí)施例2中菌株對芥酸酰胺的降解曲線圖；

圖9是本發(fā)明實(shí)施例2中印染廢水出水GC-MS檢測色譜圖。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合具體實(shí)施例，并參照附圖，對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

本實(shí)施例提供了可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的獲取方法，具體的技術(shù)方案如下：

1、菌株的篩選與鑒定

(1)菌株的分離與純化

采用某印染廢水污水處理廠生化池中的活性污泥作為分離用泥。將活性污泥按照10％的比例加入到含芥酸酰胺的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)2-7天。含芥酸酰胺的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基包括NH4Cl 0.38g/L、NaCl 5g/L、K2HPO4 0.5g/L、KH2PO4 0.5g/L、MgSO4·7H2O 0.2g/L、CaCl2 0.01g/L、FeSO4·7H2O0.001g/L和芥酸酰胺0.3-0.9g/L。

在含芥酸酰胺的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基上，將富集菌液采用稀釋涂布法以及劃線法進(jìn)行分離和純化，得到在純化菌株3株。無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，加入1.5-2％的瓊脂。

稀釋涂布法及劃線純化：將富集菌液用無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基，稀釋成10 -1-10 -66個梯度，每個梯度取100μl分別涂布于含芥酸酰胺的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基上，每個梯度做5個平行，在30℃培養(yǎng)48h，挑取平板上長出的不同菌落進(jìn)行劃線純化。獲得三個菌株，分別命名為zs1、zs4和zs5。

(2)菌株的篩選

將上述分離的3株菌懸浮液分別接種到限制氮源培養(yǎng)基、限制碳源培養(yǎng)基、限制營養(yǎng)源(氮源、氮源)培養(yǎng)基中，放入搖床，30℃，160r/min培養(yǎng)48h后，分別測量細(xì)菌濃度(OD600)和芥酸酰胺降解率。其中，芥酸酰胺為唯一氮源的限制氮源培養(yǎng)基包括芥酸酰胺0.9g/L、乙酸鈉3.42g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 40.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L和FeSO 4·7H 2O 0.001g/L；芥酸酰胺為唯一碳源的限制碳源培養(yǎng)基包括芥酸酰胺0.9g/L、NH 4Cl 0.38g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L和FeSO 4·7H2O 0.001g/L；芥酸酰胺為唯一營養(yǎng)源的限制營養(yǎng)源培養(yǎng)基中培養(yǎng)包括芥酸酰胺0.9g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 4 0.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O0.2g/L、CaCl 20.01g/L和FeSO 4·7H2O 0.001g/L。

結(jié)果如圖1所示，當(dāng)芥酸酰胺為唯一碳源，且加入培養(yǎng)基中加入氮源時，菌株zs1、zs4和zs5對芥酸酰胺的降解率分別為56％、43％和38％，整體均高于芥酸酰胺為氮源和芥酸酰胺為唯一營養(yǎng)源時對芥酸酰胺的降解率，同時細(xì)菌濃度(OD600)分別為1.24、0.98以及1.06，同樣也高于芥酸酰胺為氮源和芥酸酰胺為唯一營養(yǎng)源時對芥酸酰胺的細(xì)菌濃度。當(dāng)芥酸酰胺為唯一的營養(yǎng)源時，可以看到zs1降解率超過了40％，同時細(xì)菌濃度在0.5左右，比另外兩株的生長情況要好很多，因此后期實(shí)驗(yàn)中選擇zs1作為實(shí)驗(yàn)菌種。

2、菌株形態(tài)與分子生物學(xué)鑒定

(1)菌株形態(tài)

菌株zs1在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上劃線，于30℃下培養(yǎng)24-48h。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，氯化鈉5g/L，瓊脂15g/L，PH為7.0。菌落直徑為0.5-1.2mm，菌落呈乳白色，隆起，表面光滑沒有光澤，圓形，邊緣光滑，不透明，無臭無味。通過掃描電鏡觀察菌株顯微形態(tài)，可知該菌為桿菌，長1-2μm，寬0.5-0.8μm，如圖2所示。

(2)菌株的分子生物學(xué)鑒定

提取菌株zs1的基因組，進(jìn)行16S rDNA測序，16S rDNA的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示。將測序結(jié)果與Genbank數(shù)據(jù)庫中的已知序列進(jìn)行相似度對比，如圖3所示，菌株zs1與節(jié)桿菌屬(Arthrobacter sp.)序列同源性最高，鑒定為節(jié)桿菌。

目前，國內(nèi)外尚無文獻(xiàn)報(bào)告節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)具有降解芥酸酰胺功能，因此，菌株zs1是一株具有降解芥酸酰胺的新功能菌。該菌株于2021年9月22日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號CGMCC No.23463，保藏地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所。

實(shí)施例2

1、菌株的生長特性

(1)菌株對初始pH的適應(yīng)性

菌種活化：將菌種zs1接種于含芥酸酰胺的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中，在溫度30℃，160r/min,振蕩培養(yǎng)48-52h。

將以芥酸酰胺為碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基初始pH值分別調(diào)節(jié)為3,5,7,9和11，并按照1％的比例將上述活化菌種接種至培養(yǎng)基中，放入搖床(30℃，160r/min)，培養(yǎng)48后，測定細(xì)胞濃度及芥酸酰胺降解率。結(jié)果如圖4所示，當(dāng)初始pH過高或過低時，都不利于菌株的生長，適宜菌株zs1生長的pH范圍為5.0-7.0，最適pH為7.0。

(2)芥酸酰胺濃度對菌株的影響

在以芥酸酰胺為碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，將培養(yǎng)基中的芥酸酰胺濃度依次調(diào)整為0.3g/L、0.6g/L、0.9g/L、1.2g/L、1.5g/L。將活化后的菌株按照1％的比例接種至培養(yǎng)基中，30℃，160r/min搖床培養(yǎng)48h后，分別測定菌株濃度和芥酸酰胺降解率。結(jié)果如圖5所示，當(dāng)芥酸酰胺濃度為0.9g/L時，菌株zs1對芥酸酰胺的降解率最高，而當(dāng)芥酸濃度達(dá)到1.2g/L甚至更高時，菌株生長受到抑制，同時對芥酸酰胺的降解率也驟降。

(3)氮源濃度對菌株生長的影響

在以芥酸酰胺為碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，將培養(yǎng)基中的氮源(NH4Cl)依次調(diào)整為50mg/L、100mg/L、200mg/L、300mg/L和400mg/L。將活化后的菌株按照1％的比例接種至培養(yǎng)基中，30℃，160r/min搖床培養(yǎng)48h后，分別測定菌株濃度和芥酸酰胺降解率。結(jié)果如圖6所示，當(dāng)?shù)礉舛仍?00-400mg/L時，適合菌株生長。當(dāng)?shù)礉舛葹?00mg/L時，菌株生長狀況最佳且對芥酸酰胺的降解率最高。

(4)培養(yǎng)溫度對芥酸酰胺降解菌株的影響

將活化后的菌株按照1％的比例接種至以芥酸酰胺為碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基上，分別在20、25、30、35和40℃條件下?lián)u床(160r/min)培養(yǎng)48h，分別測定細(xì)菌濃度和芥酸酰胺降解率。結(jié)果如圖7所示，菌株的適宜生長溫度為25℃～35℃，溫度過高或過度均會影響菌株生長。在30℃時，菌株降解效率最高，達(dá)到了51％，而生長狀況與25℃沒有太大差別，因此選擇30℃為菌株的最適培養(yǎng)溫度。

(5)芥酸酰胺的降解曲線

在上述所測量的最適芥酸酰胺初始濃度，最佳pH以及最適氮源濃度基礎(chǔ)上，將活化后的菌株按照1％的比例接種至以芥酸酰胺為碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中，在30℃，160r/min震蕩培養(yǎng)，每隔12h取樣檢測。結(jié)果如圖8所示，菌株zs1在接種后36h后才進(jìn)入對數(shù)期，菌體數(shù)量驟然增加，芥酸酰胺降解率也明顯升高。培養(yǎng)60h后，進(jìn)入穩(wěn)定期，芥酸酰胺降解率趨于穩(wěn)定，維持在55％，同時菌株繁殖速度下降。

因此，本實(shí)施例提供了可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的培養(yǎng)方法，具體的技術(shù)方案如下：

將實(shí)施例1中的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌接種至專用培養(yǎng)基中，于25℃～35℃的搖床(160r/min)震蕩培養(yǎng)48h以上，專用培養(yǎng)基包括NH 4Cl 0-1.52g/L、NaCl 5g/L、K 2HPO 40.5g/L、KH 2PO 4 0.5g/L、MgSO 4·7H 2O 0.2g/L、CaCl 2 0.01g/L、FeSO 4·7H 2O 0.001g/L和芥酸酰胺0.3-0.9g/L，專用培養(yǎng)基的pH為5.0-7.0。

實(shí)施例3

本實(shí)施例提供了可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌的應(yīng)用，具體的技術(shù)方案如下：

某印染廢水污水處理廠出水COD超標(biāo)，出水水樣經(jīng)GC-MS檢測分析，發(fā)現(xiàn)主要含有芥酸酰胺，如圖9所示，48.64出峰處經(jīng)分析為芥酸酰胺，濃度為0.083g/L。在該污水處理廠好氧池前端按照1‰的比例加入實(shí)施例2中的可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌接種，經(jīng)過3天后，出水中的COD已降至標(biāo)準(zhǔn)50mg/L以下。取樣檢測好氧池出水中的芥酸酰胺，發(fā)現(xiàn)芥酸酰胺濃度已經(jīng)降至0.029g/L，降解率達(dá)到了65％。表明芥酸酰胺降解菌用于處理大規(guī)模印染污水時，可以有效的減少污水中芥酸酰胺，從而達(dá)到降低COD的目的。

上述僅本發(fā)明較佳可行實(shí)施例，并非是對本發(fā)明的限制，本發(fā)明也并不限于上述舉例，本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員，在本發(fā)明的實(shí)質(zhì)范圍內(nèi)，所做出的變化、改型、添加或替換，也應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

序列表

<110> 恒臻（無錫）生物科技有限公司

<120> 可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌及其獲取方法、培養(yǎng)方法和應(yīng)用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1469

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

tggctcagga tgaacgctgg cggcgtgctt aacacatgca agtcgaacga tgatccggtg 60

cttgcgccgg ggattagtgg cgaacgggtg agtaacacgt gagtaacctg cccttgactc 120

tgggataagc ctgggaaact gggtctaata ccggatatga ctcctcatcg catggtgggg 180

ggtggaaagc tttttgtggt tttggatgga ctcgcggcct atcagcttgt tggtggggta 240

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agctcgtagg cggtttgtcg cgtctgctgt gaaagaccgg ggctcaactc cggttctgca 600

gtgggtacgg gcagactaga gtgcagtagg ggagactgga attcctggtg tagcggtgaa 660

atgcgcagat atcaggagga acaccgatgg cgaaggcagg tctctgggct gtaactgacg 720

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acatggaccg gaaagacctg gaaacaggtg ccccgcttgc ggccggttta caggtggtgc 1020

atggttgtcg tcagctcgtg tcgtgagatg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc 1080

tcgttctatg ttgccagcgg ttcggccggg gactcatagg agactgccgg ggtcaactcg 1140

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cgaaagttgg taacacccga agccggtggc ctaacccttg tggggggagc cgtcgaaggt 1440

gggaccggcg attgggacta agtcgtaaa 1469

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可降解芥酸酰胺的節(jié)桿菌及其獲取方法、培養(yǎng)方法和應(yīng)用.pdf