本發(fā)明涉及一種有效降低曼地亞紅豆杉(Taxus?x?media)細胞合成C-14位氧化紫杉烷(C-14?oxygenated?taxoids)的方法,屬于基因工程的技術領域,是通過根癌農(nóng)桿菌介導的雙元載體轉化系統(tǒng)將針對紅豆杉紫杉烷14β羥基化酶基因(簡稱14OH)片段構建的反義基因表達載體導入到曼地亞紅豆杉(Taxus?x?media)培養(yǎng)細胞中。利用優(yōu)化的轉化方法成功地獲得了轉基因細胞。PCR-Southern雜交、RT-PCR基因表達分析和化學成分檢測結果顯示:曼地亞紅豆杉細胞轉基因試驗取得成功,轉基因細胞系中14OH基因mRNA表達水平發(fā)生顯著地下降。本發(fā)明顯著抑制了曼地亞紅豆杉細胞向C-14位氧化紫杉烷的流向,有望使代謝流向包括抗癌藥物紫杉醇(taxol)和及其前體巴可亭III(baccatin?III)在內的C-13位氧化紫杉烷(C-13oxygenated?taxoids),從而為提高紫杉醇的生物合成產(chǎn)量提供一條新方法。
聲明:
“有效抑制曼地亞紅豆杉細胞生物合成C-14位氧化紫杉烷的方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)