本發(fā)明涉及一種利用枯草芽孢桿菌表達天蠶素AD的方法及其制備方法。以枯草芽孢桿菌WB800N為宿主菌株,大腸?枯草穿梭載體為表達載體,設(shè)計合成融合蛋白編碼基因(SPSacB)SUMO?CAD,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示,成功構(gòu)建重組表達載體pGJ148?(PSacB)SUMO?CAD。應(yīng)用化學(xué)轉(zhuǎn)化方式轉(zhuǎn)入宿主菌感受態(tài)細胞中,利用麥芽糖誘導(dǎo)發(fā)酵,實現(xiàn)外源蛋白成功表達,通過NI?NTA柱和蛋白質(zhì)純化分析儀純化后獲得了純度較高的融合蛋白,利用SUMO酶切后獲得重組抗菌肽,之后對發(fā)酵條件進行優(yōu)化。本發(fā)明成本低,利于分離純化。
聲明:
“利用枯草芽孢桿菌表達天蠶素AD的方法及其制備方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)